TWiki chủ yếu được sử dụng tại công sở như một wiki công ty[8] để phối hợp các hoạt động nhóm, các dự án theo dõi, thực hiện tiến trình công việc[9] và như một Wiki Intranet. Cộng đồng TWiki ước tính có khoảng 40.000 trang web wiki của công ty vào tháng 3/2007, và 20.000 trang web TWiki công cộng.[10]

Khách hàng TWiki bao gồm các công ty thuộc nhóm Fortune 500 như Disney, Google, Motorola, Nokia, Oracle và Yahoo, cũng như trong các doanh nghiệp vừa và nhỏ,[11][12] và DHL.[13] TWiki cũng từng được sử dụng để tạo ra các trang cộng tác, chẳng hạn như wiki FutureMelbourne của thành phố Melbourne, nơi người dân có thể góp ý về kế hoạch tương lai của thành phố.[14]